人脐血内皮祖细胞体内促进血管重建的实验研究(2)
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培养仍有细胞贴壁生长。EPC在Fibronectin包被的培养皿中培养24h后，可见到部分圆形大单核细胞粘附于培养瓶底，3天后细胞贴壁完全，少量细胞开始伸展，随着诱导培养时间的延长，圆形细胞逐渐减少，梭形细胞数量逐渐增多。7天左右出现由十数个细胞形成的细胞集落，可见20～30或更多数目细胞排列成内皮细胞特异性条索状结构或网格状结构。10天后形成明显克隆，并有梭形贴壁细胞从其边缘不断生成，2～3周，细胞长满培养瓶底，单层细胞呈多角形融合成片状(图2)。
2.3原代培养第10天细胞透射电镜显示：人脐血EPC平均直径15μm，核/浆比例大。细胞膜伸出许多伪足丝，基底膜呈多层。胞浆内可见一种短棒状小体，含平行管状的内部结构，即Weibel-Palade小体(图3)，是内皮细胞最具特征性的细胞器。
2.4 5只裸鼠接种细胞7天后均见肿瘤快速生长，抗人vWF免疫荧光组织化学染色显示大量EPC参与肿瘤血管构建(图4)。
2.5 EPC参与皮辦血管重建的观察：通过实验室体外培养，证实染色后细胞增殖活性无明显变化，在荧光显微镜下可以清楚地辨别细胞的轮廓，染料在细胞膜上分布均匀一致。通过移植后7天皮瓣中段真皮下层荧光显微镜观察，发现皮辦真皮下层存在能激发出红色荧光的细胞，多呈散在分布 ......
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