葡萄糖-6-磷酸异构酶与国产抗CCP抗体诊断类风湿关节炎的价值(2)
2.2 国产抗CCP抗体 由上海富纯中南生物技术有限公司提供。检测程序：检测原理为ELISA间接法,将待测血清1∶100稀释,分别加入稀释血清、阴性对照、阳性对照及弱阳性对照100 μl,室温孵育30 min,洗板5次后拍干,每孔加入辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG抗体100 μl,室温孵育30 min,洗板5次后拍干,每孔加入显色剂A和显色剂B各50 μl,室温孵育30 min,加终止液50 μl,最后450 nm比色。以25、50、100、200、400、800 U为标准绘制曲线，>25 U判为阳性。2.3 EUROIMMUN抗CCP抗体 试剂由德国欧蒙医学实验诊断股份公司提供。采用ELISA测定抗CCP IgG型抗体。将血清1∶100稀释,加入用已知cDNA序列人工合成的CCP抗原包被的微孔中,室温温育60 min,洗板3次后加入酶标记的兔抗人IgG抗体,室温温育30 min,洗板后加入底物反应30 min,再加入2 mol/L硫酸终止反应 ......
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