血清表皮生长因子检测在类风湿关节炎患者中的临床研究(1)
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【摘要】 目的 通过检测类风湿关节炎(RA)患者血清中表皮生长因子(EGF)的水平，探讨其在RA发病过程中存在的意义。方法 将研究对象分为RA组和健康对照组，用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定两组血清中EGF水平。同时测定RA 患者的类风湿因子(RF)、红细胞沉降率(ESR)和C反应蛋白(CRP)。用统计学分析EGF在各组血清中的变化及其与临床各项指标间的相关性。结果 RA组血清EGF水平较正常对照组显著升高(P<0.05)。骨质破坏组血清EGF水平较单纯骨质疏松组显著升高(P<0.05)。RA组EGF水平与RF，ESR，CRP水平比较无显著相关性(P>0.05)。结论 血清EGF水平在RA组明显升高，在骨质破坏组尤为明显。提示EGF在诊断RA中有一定价值，可能部分地参与RA的发病过程。
【关键词】
关节炎；类风湿；表皮生长因子
作者单位：266011山东省青岛市市立医院检验科
表1
加样回收率试验(n=5)
成分序号样品量/μg加入量/μg测得量/μg回收率/%平均回收率/%RSD/%
酚酞179.773816.28896.6001100.56100.100.26
280.704896.877999.88
379.557995.8786100.03
476.187392.4897100.02
582.675098.9899100.03
图1
酚酞片中酚酞含量测定的HPLC 色谱图
A，酚酞对照品及系统适应性、B，酚酞样品、C，空白
2.9 样品含量测定 取4批样品分别按上述方法制备及色谱条件测定，以标准曲线方程计算含量，并与现行标准测的酚酞含量进行比较，结果见表2。
3 讨论
3.1 流动相的选择 参阅相关资料[13]，选择甲醇0.05%磷酸为流动相，通过调整比例和流速进行考察后发现，以甲醇0.05%磷酸(70∶30)流速0.8 ml/min为流动相时，酚酞和荧光母素分离效果好，保留时间、对称因子、塔板数均符合要求。
表2
酚酞片含量测定结果(标示量的百分含量%)
批号HPLC(%)UV(%)
10050198.9699.95
100907199.06100.16
10101896.8597.15
091207100.06102.66
3.2 检测波长的选择 采用PDA检测器，采集210~400 nm3 d图谱，提取酚酞色谱峰处的光谱图，表明其在229nm与275nm波长处有最大吸收，在229nm波长处溶剂的紫外吸收会影响测定，故选择275nm作为检测波长。
3.3 溶剂的选择 酚酞水溶性较差，可溶于甲醇、乙醇，原标准[4]采用乙醇作为溶剂，荧光母素采用无水乙醇作为溶剂。在使用甲醇作为溶剂时发现，荧光母素溶于甲醇后不稳定，放置一段时间，即出现絮凝，改用乙醇，即无该现象。综合考虑，在配置对照品贮备液时用乙醇作为溶剂，在二步稀释时采用流动相作为溶剂，样品采用乙醇超声10 min即可溶解。
参 考 文 献
[1] 吴红英.高效液相色谱法测定酚酞片中酚酞含量研究.山西医药杂志，2010，39(2)：161162.
[2] 王玫，曹霞.HPLC法测定酚酞片的含量探讨.黑龙江医药，2009，22(3)：260261.
[3] 梁选革，伍国怡.高效液相色谱法测定酚酞溶液与酚酞片中荧光母素含量.医药导报，2006，25(11)：12101211.
[4] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部).北京：化学工业出版社，2010：882.
Clinical significance of detecting serum epidermal growth factor Level in patients with rheumatoid arthritis
ZHANG Binguo,LUAN Qingxin.Department of Clinical Laboratory,Qingdao Muniapal Hospital,Qingdao 266011,China
【Abstract】 Objective
To detect the serum levels of epidermal growth factor(EGF)in rheumatoid arthritis(RA)patients ......
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