唾液酸苷酶和白细胞酯酶联合检测在细菌性阴道病诊断的意义
【摘要】 目的 探讨唾液酸苷酶和白细胞酯酶联合检测在妇科细菌性阴道病(BV)诊断中的价值。方法 1680例妇产科就诊的患者， 对其阴道分泌物进行常规检验分析， 同时做唾液酸苷酶和白细胞酯酶单项和联合检测， 观察患者BV发病情况。结果 1680例患者中， BV发病率为15.5%；唾液酸苷酶和白细胞酯酶联合检测的特异性为100.00%， 准确性为97.08%， 阳性预测值为100.00%， 均高于单独使用一种酶检验(P<0.001)；联合检测法与金标准结果一致性较好(P<0.001)。结论 在BV的辅助诊断中， 唾液酸苷酶和白细胞酯酶联合检测具有较高的准确性和特异性， 在BV早期诊断中具有重要临床推广价值。
【关键词】 唾液酸苷酶；白细胞酯酶；细菌性阴道病
DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.23.023
BV是妇科最常见的感染性疾病之一， 诊断不及时或不准确会导致病情加重， 尤其影响育龄女性的生殖系统健康[1]。目前实验室诊断主要是盐水涂片法找线索细胞[2]， 由于取材及涂片的因素易造成漏检， 同时容易受其他有形成分的干扰， 病原体检出率低。有报道， 唾液酸苷酶检测BV具有简洁、快速等特点[3]， 也有联合检测BV的方法报道[4， 5]。本研究拟采用唾液酸苷酶和白细胞酯酶联合检测BV， 评价其在BV诊断中的价值。现报告如下。
1 资料与方法
1. 1 一般资料 回顾分析2014年1～5月在本院妇产科就诊的1680例女性患者， 年龄17～58岁， 平均年龄35岁。被检测者要求取样前24 h内禁止性生活、盆浴、阴道灌洗及局部上药。
1. 2 标本采集 由妇科医生用无菌棉拭子取阴道壁上、子宫颈管或后穹窿分泌物置于装有0.5 ml 0.9%氯化钠溶液的一次性塑料试管中混匀送检。
1. 3 检测方法 唾液酸苷酶检测试剂盒、白细胞酯酶检测试剂盒及检测仪均由珠海迪尔生物工程有限公司提供。
1. 3. 1 唾液酸苷酶检测法 将分泌物置于检测反应杯中， 摇匀静置10 min， 终止反应观察其颜色， 蓝色或绿色为阳性， 无色为阴性。
1. 3. 2 白细胞酯酶检测法 于宫颈内1 cm左右处采用无菌拭子采集宫颈分泌物， 置于0.9%氯化钠溶液， 将溶液滴入试剂板， 静置10 min， 将颜色与比色板进行对比， 蓝色或绿色为阳性， 无色则为阴性。
1. 4 检测标准 以下4项中符合3项即可诊断BV[6]：①分泌物为均匀一致的稀薄白带；②阴道pH>4.5；③氨试验阳性， 取少量阴道分泌物于玻璃片上， 10%氢氧化钾溶液1～2滴， 产生烂鱼样腥臭味即为阳性；④线索细胞阳性， 高倍显微镜下线索细胞超过20%。
1. 5 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件对数据进行统计分析。计数资料以率(%)表示， 采用χ2检验。一致性分析采用Kappa检验， 检验水准α(双侧)=0.05。P<0.05表示差异具有统计学意义。
2 结果
2. 1 单项和联合试验检测VB 单独使用唾液酸苷酶法、白细胞酯酶法和两种方法联用的敏感性、特异性、准确性、阴性预测值和阳性预测值相比较， 差异均具有统计学意义(χ2=23.93、119.27、22.57、17.99、81.20；P<0.001)；二者联合检测的敏感性为81.25%， 特异性为100.00%， 阴性预测值为96.67%， 阳性预测值为100.00%。见表1， 表2。
2. 2 一致性分析 对单项和联合试验检测的一致性进行了分析， 单项和联合检测均与金标准检测结果相一致(P<0.001)。见表3。
3 讨论
BV是由于阴道菌群失调， 乳酸杆菌减少而导致其他致病菌如加德纳菌、各种厌氧菌、弯曲弧菌等的大量繁殖， 一般情况下BV是以加德纳菌为主的一种混合感染[7， 8]， 10%～50%的患者无临床症状[4]。实验室诊断主要是白带常规检查， 依赖显微镜的检查， 结果受主观因素的影响， 判断标准不一致， 漏检、误判率高， 同时检测结果易受标本保存条件影响[8]。
唾液酸苷酶法主要利用BV发病产生的唾液酸苷酶进行检测， 其活性与病原菌数量成正比；白细胞酯酶阳性是阴道黏膜受损或炎症的标志， 其活性与原菌数量成正比。徐慧丽等[4]应用唾液酸苷酶、过氧化氢酶和白细胞酯酶联合检测BV， 检测率为32.6%， 同时发现阴道清洁度与年龄对BV检出率具有一定的影响。张建忠[5]通过单独或联合使用唾液酸苷酶、白细胞酯酶和H2O2诊断1160例患者中BV的发病情况， 发现唾液酸苷酶和白细胞酯酶联合检测的敏感性为99.56%， 特异性为78.01%， 准确性为91.04%。
本研究采用唾液酸苷酶和白细胞酯酶检测1680例患者中BV的发病情况， 采用传统涂片法作为金标准， 比较两种方法单独使用和联合使用的诊断价值。结果表明， 联合检测方法具有较高的特异性(100.00%)、准确性(97.08%)和阳性预测值(100.00%)；三种方法检测结果与金标准结果一致性较高。本研究发现唾液酸苷酶阳性者的念珠菌和滴虫感染高于唾液酸苷酶阴性者， 阴道内正常微生物失去平衡往往会诱发条件致病菌成为事实致病菌[8]。由于BV的失衡菌群产生大量的过氧化氢， 从而改变微环境的pH值， 损害阴道上皮细胞， 使得致病菌如念珠菌等入侵的机会大大增加， 加速BV的进程[7]。
综上所述， 唾液酸苷酶活性测定法在BV诊断中的临床价值较高， 可为疾病的诊断提供较好的依据， 联合白细胞酯酶活性检测可提高特异性和准确性， 两种方法联合检测配合传统检测手段应用于检测阴道炎， 可及早的诊断和治疗， 给临床提供更准确信息。
参考文献
[1]Africa CW， Nel J， Stemmet M. Anaerobes and bacterial vaginosis in pregnancy： virulence factors contributing to vaginal colonisation. Int J Environ Res Public Health， 2014， 11(7)：6979-7000.
[2]邓晶荣， 王静， 牟凤玲. 革兰染色和生理盐水法在妇女阴道炎性反应分泌物中的对比分析. 检验医学与临床， 2011， 8(7)：858-859.
[3]张珍， 张昭勇， 杜鹃， 等. 唾液酸酶法检测细菌性阴道病的临床分析. 现代中西医结合杂志， 2013， 22(1)：1424-1425.
[4]徐慧丽， 吴冬生， 钟桥. BV三联检测在细菌性阴道病诊断中的应用. 国际检验医学杂志， 2013， 34(23)：3203-3205.
[5]张建忠. 细菌性阴道病三项检测试验联合检测的临床应用价值. 实验与检验医学， 2010， 28(4)：373-374， 402.
[6]曹泽毅. 中华妇产科学.北京：人民卫生出版社， 2008：1352-1358.
[7]Myziulk L， Romanowski B， Johnson SC. BV Blue test for diagnosis of bacterial vaginosis. J Clin Microbiol， 2003， 41(5)：1925-1928.
[8]庄国华， 王淳玉， 李宏， 等.细菌性阴道病联合检测技术在阴道合并感染诊断中的价值.中国妇幼保健， 2010， 25(18)：2517-2518.
[收稿日期：2015-03-20] (张健清 王东 黄玉娴 张式鸿)
【关键词】 唾液酸苷酶；白细胞酯酶；细菌性阴道病
DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.23.023
BV是妇科最常见的感染性疾病之一， 诊断不及时或不准确会导致病情加重， 尤其影响育龄女性的生殖系统健康[1]。目前实验室诊断主要是盐水涂片法找线索细胞[2]， 由于取材及涂片的因素易造成漏检， 同时容易受其他有形成分的干扰， 病原体检出率低。有报道， 唾液酸苷酶检测BV具有简洁、快速等特点[3]， 也有联合检测BV的方法报道[4， 5]。本研究拟采用唾液酸苷酶和白细胞酯酶联合检测BV， 评价其在BV诊断中的价值。现报告如下。
1 资料与方法
1. 1 一般资料 回顾分析2014年1～5月在本院妇产科就诊的1680例女性患者， 年龄17～58岁， 平均年龄35岁。被检测者要求取样前24 h内禁止性生活、盆浴、阴道灌洗及局部上药。
1. 2 标本采集 由妇科医生用无菌棉拭子取阴道壁上、子宫颈管或后穹窿分泌物置于装有0.5 ml 0.9%氯化钠溶液的一次性塑料试管中混匀送检。
1. 3 检测方法 唾液酸苷酶检测试剂盒、白细胞酯酶检测试剂盒及检测仪均由珠海迪尔生物工程有限公司提供。
1. 3. 1 唾液酸苷酶检测法 将分泌物置于检测反应杯中， 摇匀静置10 min， 终止反应观察其颜色， 蓝色或绿色为阳性， 无色为阴性。
1. 3. 2 白细胞酯酶检测法 于宫颈内1 cm左右处采用无菌拭子采集宫颈分泌物， 置于0.9%氯化钠溶液， 将溶液滴入试剂板， 静置10 min， 将颜色与比色板进行对比， 蓝色或绿色为阳性， 无色则为阴性。
1. 4 检测标准 以下4项中符合3项即可诊断BV[6]：①分泌物为均匀一致的稀薄白带；②阴道pH>4.5；③氨试验阳性， 取少量阴道分泌物于玻璃片上， 10%氢氧化钾溶液1～2滴， 产生烂鱼样腥臭味即为阳性；④线索细胞阳性， 高倍显微镜下线索细胞超过20%。
1. 5 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件对数据进行统计分析。计数资料以率(%)表示， 采用χ2检验。一致性分析采用Kappa检验， 检验水准α(双侧)=0.05。P<0.05表示差异具有统计学意义。
2 结果
2. 1 单项和联合试验检测VB 单独使用唾液酸苷酶法、白细胞酯酶法和两种方法联用的敏感性、特异性、准确性、阴性预测值和阳性预测值相比较， 差异均具有统计学意义(χ2=23.93、119.27、22.57、17.99、81.20；P<0.001)；二者联合检测的敏感性为81.25%， 特异性为100.00%， 阴性预测值为96.67%， 阳性预测值为100.00%。见表1， 表2。
2. 2 一致性分析 对单项和联合试验检测的一致性进行了分析， 单项和联合检测均与金标准检测结果相一致(P<0.001)。见表3。
3 讨论
BV是由于阴道菌群失调， 乳酸杆菌减少而导致其他致病菌如加德纳菌、各种厌氧菌、弯曲弧菌等的大量繁殖， 一般情况下BV是以加德纳菌为主的一种混合感染[7， 8]， 10%～50%的患者无临床症状[4]。实验室诊断主要是白带常规检查， 依赖显微镜的检查， 结果受主观因素的影响， 判断标准不一致， 漏检、误判率高， 同时检测结果易受标本保存条件影响[8]。
唾液酸苷酶法主要利用BV发病产生的唾液酸苷酶进行检测， 其活性与病原菌数量成正比；白细胞酯酶阳性是阴道黏膜受损或炎症的标志， 其活性与原菌数量成正比。徐慧丽等[4]应用唾液酸苷酶、过氧化氢酶和白细胞酯酶联合检测BV， 检测率为32.6%， 同时发现阴道清洁度与年龄对BV检出率具有一定的影响。张建忠[5]通过单独或联合使用唾液酸苷酶、白细胞酯酶和H2O2诊断1160例患者中BV的发病情况， 发现唾液酸苷酶和白细胞酯酶联合检测的敏感性为99.56%， 特异性为78.01%， 准确性为91.04%。
本研究采用唾液酸苷酶和白细胞酯酶检测1680例患者中BV的发病情况， 采用传统涂片法作为金标准， 比较两种方法单独使用和联合使用的诊断价值。结果表明， 联合检测方法具有较高的特异性(100.00%)、准确性(97.08%)和阳性预测值(100.00%)；三种方法检测结果与金标准结果一致性较高。本研究发现唾液酸苷酶阳性者的念珠菌和滴虫感染高于唾液酸苷酶阴性者， 阴道内正常微生物失去平衡往往会诱发条件致病菌成为事实致病菌[8]。由于BV的失衡菌群产生大量的过氧化氢， 从而改变微环境的pH值， 损害阴道上皮细胞， 使得致病菌如念珠菌等入侵的机会大大增加， 加速BV的进程[7]。
综上所述， 唾液酸苷酶活性测定法在BV诊断中的临床价值较高， 可为疾病的诊断提供较好的依据， 联合白细胞酯酶活性检测可提高特异性和准确性， 两种方法联合检测配合传统检测手段应用于检测阴道炎， 可及早的诊断和治疗， 给临床提供更准确信息。
参考文献
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[收稿日期：2015-03-20] (张健清 王东 黄玉娴 张式鸿)