不同大肠黏膜组织Hp、CyclinD1、P16免疫组化表达分析(1)
【摘要】 目的 分析不同大肠黏膜组织幽门螺杆菌(Hp)、细胞周期素D1(Cyclin D1)、P16免疫组化结果， 并分析各组织中Hp感染与Cyclin D1、P16表达的关系。方法 选取78例大肠组织标本， 其中大肠癌患者40例、大肠腺瘤患者20例、非肿瘤大肠黏膜患者18例， 应用免疫组化技术检测不同大肠黏膜组织Hp、 Cyclin D1、 P16的表达情况。观察比较不同大肠黏膜组织Hp、Cyclin D1、P16阳性率， 并分析不同大肠黏膜组织中Hp感染与Cyclin D1、P16阳性表达相关性。结果 大肠癌患者的Hp、Cyclin D1、P16阳性率分别为55.0%、82.5%、77.5%， 大肠腺瘤患者的Hp、Cyclin D1、P16阳性率分别为20.0%、 80.0%、 10.0%， 非肿瘤大肠黏膜患者的Hp、Cyclin D1、P16阳性率分别为11.1%、11.1%、0;大腸癌、大肠腺瘤与非肿瘤大肠黏膜患者Hp、Cyclin D1、P16阳性率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。大肠癌及大肠腺瘤患者中， Hp感染与Cyclin D1、 P16阳性表达结果呈正相关(大肠癌：r=0.509、r=0.596， P<0.05;大肠腺瘤：r=0.289、r=0.667， P<0.05)。非肿瘤大肠黏膜患者中， Hp感染与cycinD1阳性表达结果呈正相关(r=0.395， P<0.05)， Hp感染与P16阳性表达无相关性(P>0.05)。结论 Hp是大肠上皮性肿瘤的发生、发展的因素之一， 大肠癌组织中Hp对P16、Cyclin D1的表达结果影响具有相关性， 其中的可能机制有待进一步探讨。
【关键词】 大肠癌;大肠腺瘤;幽门螺杆菌;细胞周期素D1;P16
DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.20.087
幽门螺杆菌(helicobacterpylori， Hp)于1994年被国际癌症研究机构(IARC)列为人类胃癌的第I类致癌因子。随着现代医学的不断发展， 有很多学者研究认为Hp感染与大肠癌、冠心病、类风湿、肝胆疾病等多种疾病有相关性， 但尚未得到完全确证。大肠癌又称结直肠癌(colorectal cancer， CRC)， 在我国居民常见的恶性肿瘤中排第五名[1]。Cyclin D1异常表达， 通过基因扩增， 可导致多种肿瘤发生， 如乳腺癌、肠癌、食管癌。P16是抑癌基因的一种， 又称多种肿瘤抑制基因， 它可以在细胞增殖周期某个环节上对细胞分裂和生长产生适当的调控作用。本研究是通过免疫组化方式检测不同大肠(结肠和直肠)黏膜(非肿瘤、上皮性肿瘤)组织中Hp感染情况及Hp感染与P16和Cyclin D1表达的关系。现报告如下。
1 材料与方法
1. 1 材料 收集2016年4月～2019年4月清远市中医院脾胃科的78例大肠组织标本， 其中大肠癌患者40例， 男22例， 女18例， 平均年龄64.5岁;大肠腺瘤患者20例， 男11例， 女9例， 平均年龄54.7岁;非肿瘤大肠黏膜患者18例， 男8例， 女10例， 平均年龄50.9岁。由具有高级职称的病理医师来判读本次研究的所有病例标本的病理诊断及免疫组化结果。
1. 2 研究方法 本次研究采用pv-6000两步法免疫组化方法， 采用DAB显色试剂盒， 第一抗体Hp、P16、Cyclin D1及相关试剂购均购北京中杉金桥生物技术有限公司。按照试剂盒使用说明书来进行具体操作， 阴性对照以磷酸缓冲盐溶液(PBS)替代一抗， 阳性对照采用本院慢性胃炎黏膜组织Hp阳性切片。
1. 3 观察指标及判定标准 观察比较不同大肠黏膜组织Hp、Cyclin D1、P16阳性率， 并分析不同大肠黏膜组织中Hp感染与Cyclin D1、P16阳性表达相关性。判定标准：Hp阳性表达结果可定位于肠黏膜组织周边的黏液及表面上皮附近(阳性对照见图1)， 呈棕褐色颗粒状或短棒状结构， 弥散、片状分布(见图2， 图3)。p16染色阳性呈棕黄色， 异常表达时位于胞浆， 正常细胞定位于细胞核。Cyclin D1阳性表达定位于细胞核。
1. 4 统计学方法 采用SPSS23.0统计学软件对数据进行处理。计数资料以率(%)表示， 采用χ2检验;采用Spearman等级相关分析检测标志物免疫组化表达间的相关性。P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2. 1 不同大肠黏膜组织Hp、Cyclin D1、P16阳性率比较 大肠癌患者的Hp、Cyclin D1、P16阳性率分别为55.0%、82.5%、77.5%， 大肠腺瘤患者的Hp、Cyclin D1、P16阳性率分别为20.0%、80.0%、10.0%， 非肿瘤大肠黏膜患者的Hp、Cyclin D1、P16阳性率分别为11.1%、11.1%、0;大肠癌、大肠腺瘤与非肿瘤大肠黏膜患者Hp、Cyclin D1、P16阳性率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1， 表2。
2. 2 不同大肠黏膜组织中Hp感染与Cyclin D1、P16阳性表达相关性分析 大肠癌及大肠腺瘤患者中， Hp感染与Cyclin D1、 P16阳性表达结果呈正相关(大肠癌：r=0.509、r=0.596， P<0.05;大肠腺瘤：r=0.289、r=0.667， P<0.05)。非肿瘤大肠黏膜患者中， Hp感染与Cyclin D1阳性表达结果呈正相关(r=0.395， P<0.05)， Hp感染与P16阳性表达无相关性(P>0.05)。
3 讨论
Nam等[3]研究发现， 大肠息肉患病率在Hp感染组占63.4%， Hp是大肠肿瘤发生的危险因素， 它可能通过释放一些抗原物质， 激活全身免疫反应进而导致肠黏膜损害和息肉形成。赖广顺等[4]的研究结果显示， Hp感染可能是结直肠肿瘤发病的一个危险因素。梁云佳等[5]通过大数据研究显示， Hp测试阳性组与阴性组相比， 大肠腺瘤和大肠癌发病率较高， 大肠病变位置在远端结肠有显著差异(P<0.05)。本研究结果也发现， 大肠癌Hp阳性病例中， 有75%的患者发生在直肠和乙状结肠。, http://www.100md.com(胡永波 汪雪琦 舒晴)
【关键词】 大肠癌;大肠腺瘤;幽门螺杆菌;细胞周期素D1;P16
DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.20.087
幽门螺杆菌(helicobacterpylori， Hp)于1994年被国际癌症研究机构(IARC)列为人类胃癌的第I类致癌因子。随着现代医学的不断发展， 有很多学者研究认为Hp感染与大肠癌、冠心病、类风湿、肝胆疾病等多种疾病有相关性， 但尚未得到完全确证。大肠癌又称结直肠癌(colorectal cancer， CRC)， 在我国居民常见的恶性肿瘤中排第五名[1]。Cyclin D1异常表达， 通过基因扩增， 可导致多种肿瘤发生， 如乳腺癌、肠癌、食管癌。P16是抑癌基因的一种， 又称多种肿瘤抑制基因， 它可以在细胞增殖周期某个环节上对细胞分裂和生长产生适当的调控作用。本研究是通过免疫组化方式检测不同大肠(结肠和直肠)黏膜(非肿瘤、上皮性肿瘤)组织中Hp感染情况及Hp感染与P16和Cyclin D1表达的关系。现报告如下。
1 材料与方法
1. 1 材料 收集2016年4月～2019年4月清远市中医院脾胃科的78例大肠组织标本， 其中大肠癌患者40例， 男22例， 女18例， 平均年龄64.5岁;大肠腺瘤患者20例， 男11例， 女9例， 平均年龄54.7岁;非肿瘤大肠黏膜患者18例， 男8例， 女10例， 平均年龄50.9岁。由具有高级职称的病理医师来判读本次研究的所有病例标本的病理诊断及免疫组化结果。
1. 2 研究方法 本次研究采用pv-6000两步法免疫组化方法， 采用DAB显色试剂盒， 第一抗体Hp、P16、Cyclin D1及相关试剂购均购北京中杉金桥生物技术有限公司。按照试剂盒使用说明书来进行具体操作， 阴性对照以磷酸缓冲盐溶液(PBS)替代一抗， 阳性对照采用本院慢性胃炎黏膜组织Hp阳性切片。
1. 3 观察指标及判定标准 观察比较不同大肠黏膜组织Hp、Cyclin D1、P16阳性率， 并分析不同大肠黏膜组织中Hp感染与Cyclin D1、P16阳性表达相关性。判定标准：Hp阳性表达结果可定位于肠黏膜组织周边的黏液及表面上皮附近(阳性对照见图1)， 呈棕褐色颗粒状或短棒状结构， 弥散、片状分布(见图2， 图3)。p16染色阳性呈棕黄色， 异常表达时位于胞浆， 正常细胞定位于细胞核。Cyclin D1阳性表达定位于细胞核。
1. 4 统计学方法 采用SPSS23.0统计学软件对数据进行处理。计数资料以率(%)表示， 采用χ2检验;采用Spearman等级相关分析检测标志物免疫组化表达间的相关性。P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2. 1 不同大肠黏膜组织Hp、Cyclin D1、P16阳性率比较 大肠癌患者的Hp、Cyclin D1、P16阳性率分别为55.0%、82.5%、77.5%， 大肠腺瘤患者的Hp、Cyclin D1、P16阳性率分别为20.0%、80.0%、10.0%， 非肿瘤大肠黏膜患者的Hp、Cyclin D1、P16阳性率分别为11.1%、11.1%、0;大肠癌、大肠腺瘤与非肿瘤大肠黏膜患者Hp、Cyclin D1、P16阳性率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1， 表2。
2. 2 不同大肠黏膜组织中Hp感染与Cyclin D1、P16阳性表达相关性分析 大肠癌及大肠腺瘤患者中， Hp感染与Cyclin D1、 P16阳性表达结果呈正相关(大肠癌：r=0.509、r=0.596， P<0.05;大肠腺瘤：r=0.289、r=0.667， P<0.05)。非肿瘤大肠黏膜患者中， Hp感染与Cyclin D1阳性表达结果呈正相关(r=0.395， P<0.05)， Hp感染与P16阳性表达无相关性(P>0.05)。
3 讨论
Nam等[3]研究发现， 大肠息肉患病率在Hp感染组占63.4%， Hp是大肠肿瘤发生的危险因素， 它可能通过释放一些抗原物质， 激活全身免疫反应进而导致肠黏膜损害和息肉形成。赖广顺等[4]的研究结果显示， Hp感染可能是结直肠肿瘤发病的一个危险因素。梁云佳等[5]通过大数据研究显示， Hp测试阳性组与阴性组相比， 大肠腺瘤和大肠癌发病率较高， 大肠病变位置在远端结肠有显著差异(P<0.05)。本研究结果也发现， 大肠癌Hp阳性病例中， 有75%的患者发生在直肠和乙状结肠。, http://www.100md.com(胡永波 汪雪琦 舒晴)