RNA干扰致FRAT1基因沉默结肠癌HT29细胞模型的建立(1)
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[摘要] 目的 利用shRNA表达载体建立FRAT1基因沉默结肠癌HT29细胞模型。方法 将化学方法合成的特异性FRAT1基因siRNA，以人类结肠癌HT29细胞为实验对象，采用Lipofectamine将FRAT1基因的shRNA表达载体导入细胞后，用RT-PCR和Western blot检测目标基因FRAT1的表达水平。结果 稳定转染FRAT1 shRNA表达载体(pSINsi-FRAT1)后，FRAT1基因在mRNA和蛋白质表达水平分别下降92.63%、55.72%(P<0.05)。结论 成功地建立了FRAT1基因沉默HT29细胞模型，为研究FRAT1生物学功能打下坚实的实验基础。
[关键词] FRAT1；结肠癌；转染；RNA干扰
[中图分类号] R735.3 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2014)03(b)-0012-05
人FRAT1(frequently rearranged in advanced T cell lymphomas-1)基因最初被认为是T细胞淋巴瘤的原癌基因，是FRAT(frequetly rearranged in advanced T cell lymphomas)家族中的一员[1-2]，研究表明FRAT1基因过表达在肿瘤发生中起关键作用，并已证实人结肠癌细胞存在FRAT1基因的高表达[3]。
RNA干扰(RNA interference，RNAi)是目前应用在逆向遗传学(reverse genetics)研究中高效的基因沉默技术 ......
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于庆功 谷伟 王苏雅 张欣欣 杨子荣 李文哲 大连大学附属中山医院消化科;
【摘要】目的利用shRNA表达载体建立FRAT1基因沉默结肠癌HT29细胞模型。方法将化学方法合成的特异性FRAT1基因siRNA,以人类结肠癌HT29细胞为实验对象,采用Lipofectamine将FRAT1基因的shRNA表达载体导入细胞后,用RT-PCR和Western blot检测目标基因FRAT1的表达水平。结果稳定转染FRAT1 shRNA表达载体(pSINsi-FRAT1)后,FRAT1基因在mRNA和蛋白质表达水平分别下降92.63%、55.72%(P0.05)。结论成功地建立了FRAT1基因沉默HT29细胞模型,为研究FRAT1生物学功能打下坚实的实验基础。
【关键词】 FRAT 结肠癌 转染 RNA干扰
【分类号】R735.35
人FRAT1(frequently rearranged in advanced T celllymphomas-1)基因最初被认为是T细胞淋巴瘤的原癌基因,是FRAT(frequetly rearranged in advanced T celllymphomas)家族中的一员[1-2],研究表明FRAT1基因过表达在肿瘤发生中起关键作用,并已证实人结肠癌细胞存在FRAT1基因的
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