两型TNF—α及其受体在胸主动脉缩窄诱导压力负荷心肌肥厚小鼠中的表达(2)
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参见附件。
1.5 Western Blot检测心肌组织目的蛋白
用冰PBS漂洗后加入组织裂解液(1%NP 40，0.15% 脱氧胆酸钠，1%SDS，1%PMSF)，用考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度。加热变性、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、转膜、5% 脱脂奶粉封闭1小时，以1︰250浓度的TNF抗体4℃孵育过夜。TBST洗膜后，二抗温育1h，ECL显色，曝光。采用Gel-pro软件系统分析目的蛋白的表达量。
1.6 统计方法
使用SPSS13.0统计学软件处理，数值用()表示，结果之间分析使用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 野生型Babl/c小鼠压力负荷性心肌肥厚模型的建立
首先使用野生型Babl/c小鼠进行胸主动脉缩窄手术，制作压力负荷性小鼠心肌肥厚模型。在术后2周进行心脏形态学和血流动力学检测。由图1可见，胸主动脉所致心肌肥厚模型手术组小鼠心脏外观(在体)较假手术组小鼠有明显增大。手术组心脏体重(4.083±0.290)mg/g，相对于假手术组(5.19±0.52)mg/g，也明显升高(图1)。
超声心动图(图2)显示手术组小鼠左室舒张末期内径(3.02±0.80)mm，小于假手术组小鼠(3.31±1.10)mm，手术组左室后壁厚度(0.76±0.01)mm大于假手术小鼠(0.67±0.02)mm。在射血分数和缩短分数方面，虽然手术组均值低于假手术组(Sham：EF：83.16%±1.90%，FS：52.53%±1.60%；TAC：EF：80.91%±2.10%，FS：51.03%±2.10%)，但差异无统计学意义。
处死小鼠前使用Millar导管检测心脏血流动力学改变 ......
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